圖：北京農學院講師、博士 王慧
于北京召開的第三屆飼料酶制劑科技與產業(yè)發(fā)展大會-青年論壇上，來自北京農學院的王慧博士做了題為《解淀粉芽孢桿菌表達系統(tǒng)建立及其應用研究》的精彩報告。
1． 研究背景
解淀粉芽孢桿菌是多種工業(yè)酶制劑的生產菌株，因其具有較強的蛋白分泌能力，在作為異源宿主進行外源蛋白的高效分泌表達方面具有巨大的發(fā)展及應用前景。然而，解淀粉芽孢桿菌中存在的限制修飾系統(tǒng)、質粒穩(wěn)定性差、表達元件缺乏以及內源蛋白酶活力高等問題嚴重限制了其在基因工程中的廣泛應用。
2.研究進展
解淀粉芽孢桿菌K11是一株能高效分泌中性蛋白酶的野生型菌株，在搖瓶水平上其中性蛋白酶分泌水平可達到2700U/mL。在前期克服解淀粉芽孢桿菌遺傳轉化難和遺傳穩(wěn)定性差的基礎上，通過高效表達元件的挖掘和組合優(yōu)化、宿主菌的改良和發(fā)酵工藝條件的控制等多種手段，建立了以解淀粉芽孢桿菌蛋白酶缺陷型突變株K11（?npr）為宿主菌，PamyQ-SPaprE-TTamy為表達元件的通用性好，穩(wěn)定性強、分泌量高的解淀粉芽孢桿菌高效表達系統(tǒng)。該系統(tǒng)的建立，不僅能為更多酶制劑的高效分泌表達提高新的途徑，并且其成熟的發(fā)酵工藝條件對于重組酶制劑的工業(yè)化生產具有現(xiàn)實的應用指導意義。
