5月9-13日，由中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會主辦的第四屆中國豬業(yè)科技大會（線上會議）的疫病與防治分論壇上，肖少波、王琴、周磊、田克恭等行業(yè)權(quán)威專家圍繞當(dāng)前疫病流行動態(tài)、診斷與檢測、免疫與防控以及疫病凈化等熱點(diǎn)問題給予全面解析，吸引了4.8w人次在線觀看。本次論壇內(nèi)容涉及豬病防治的諸多方面，干活滿滿。為便于大家了解，波米畜牧對報告部分精彩內(nèi)容進(jìn)行整理，供同行參考。
《豬腸道冠狀病毒研究進(jìn)展》
肖少波 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)教授
豬腸道冠狀病毒引起的仔豬腹瀉是近10年困擾我國乃至全球養(yǎng)豬業(yè)的突出問題。近年來新發(fā)的冠狀病毒的組織、細(xì)胞、宿主感染普有逐漸擴(kuò)大的趨勢，需要我們的高度關(guān)注。
1）2010年底出現(xiàn)的PEDV變異株呈現(xiàn)高發(fā)病率、高死亡率，且毒株仍在持續(xù)變異，優(yōu)勢毒株發(fā)生變化。輪狀病毒、藍(lán)耳病毒感染可加劇PEDV的流行。
2）我國大部分地區(qū)均有PDCoV感染，抗原陽性率為10%~33%。該病毒主要引起腹瀉，但組織嗜性廣泛，且可以感染多種動物。全球PDCoV全基因組進(jìn)化分析表明，中國、美國、韓國毒株親緣關(guān)系較近，而具有更強(qiáng)致病性的東南亞毒株可能已經(jīng)傳入我國。
3）2016年發(fā)現(xiàn)的HKU2-like豬冠狀病毒可引起90%的仔豬死亡率，其致病性仍存在爭議。目前該病毒僅存在于廣東和福建。
APN是TEGV和PRCV的關(guān)鍵受體，還可能與PDCoV的組織嗜性相關(guān)；唾液酸是豬腸道冠狀病毒的共受體。
豬腸道冠狀病毒的防控
1）高度重視、加強(qiáng)生物安全與監(jiān)測，加強(qiáng)生物傳播和阻斷傳播途徑要內(nèi)外兼顧。
2）選擇同源性更高、針對性強(qiáng)、免疫原性好的疫苗，目前全球存在3類主要PEDV，我國主要為變異毒株G2群。
3）針對性地制定科學(xué)、合理的免疫程序；采用不同類型疫苗聯(lián)合免疫，針對不同健康狀態(tài)豬群采取不同的免疫策略；針對不同養(yǎng)殖模式采取不同的免疫策略。活疫苗與滅活疫苗聯(lián)合使用能夠使免疫程序更簡單，免疫效果更好。
4）應(yīng)科學(xué)返飼，做好生物安全。對于非常嚴(yán)重、反復(fù)腹瀉、疫苗控制效果不理想的豬場，可考慮采用返飼。對于有輪狀病毒、藍(lán)耳病毒或者偽狂犬病毒的豬場可以采用返飼，返飼后免疫滅活疫苗，能夠快速誘導(dǎo)高水平的中和抗體。
5）抗豬腸道冠狀病毒的藥物是研發(fā)的方向之一。
6）同時敲除CD163和APN基因的豬對PRRSV和TEGV具有抗性，抗TGEV的精準(zhǔn)編輯豬有望推向市場。
《我國豬瘟凈化與根除策略》
王琴 中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所研究員
1970-2020年，中國豬瘟病毒流行株基因組穩(wěn)定，主要流行基因2.1亞型和少量的基因1.1亞型?，F(xiàn)用豬瘟疫苗對我國流行毒株能有效保護(hù)，否定了多年認(rèn)為“由野毒株變異引起免疫失敗”的學(xué)術(shù)爭端，一旦監(jiān)測到野毒株低于81.6%，應(yīng)立即進(jìn)行動物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。
C株能抵抗全世界流行的三個基因型野毒的攻擊，不僅為世界上一些國家消滅豬瘟做出了貢獻(xiàn)，至今對我國豬瘟控制的基本策略有效。但隨著豬瘟凈化進(jìn)程的加快，應(yīng)盡快加強(qiáng)新型DIVA投苗的研發(fā)進(jìn)程，賦予C株新的涵義。
豬瘟無疫國家和地區(qū)的預(yù)防與控制是通過嚴(yán)密的日常監(jiān)測與檢疫制度，突發(fā)疫情時的應(yīng)急撲滅措施來保持無疫狀態(tài)。該方法雖然快速有效，但是由于成本過于昂貴和造成環(huán)境污染而招致越來越大的爭議。
豬瘟染疫國家和地區(qū)遏制流行態(tài)勢的主要手段是疫苗免疫，多數(shù)流行國家均實(shí)施強(qiáng)制免疫策略。在出現(xiàn)疫情時應(yīng)立即采取隔離封鎖措施，撲殺發(fā)病和感染動物，對疫點(diǎn)進(jìn)行消毒和限制動物流動，對暴露動物和受威脅動物實(shí)施緊急免疫以防疫情擴(kuò)大。非典型豬瘟或持續(xù)性感染豬瘟的出現(xiàn)，使豬瘟難以根除。
疫苗在疫病(豬瘟)消滅過程中只是階段性使用，僅靠疫苗免疫無法徹底控制和根除豬瘟。疫苗免疫在非感染時只能降低豬群的易感性，感染時則可降低發(fā)病嚴(yán)重程度，但并不能完全阻斷病毒的感染與排毒，更不能消滅豬瘟；如果沒有一個好的免疫策略，疫苗免疫也只能是減少一些損失。
新型診斷技術(shù)結(jié)合信息技術(shù)在疫情診斷、分析、監(jiān)測和生物信息學(xué)等防控措施中發(fā)揮重要作用，準(zhǔn)確快速的診斷技術(shù)可以提升傳染病的監(jiān)控能力，及時采取措施控制傳染病向更大范圍的流行。
我國豬瘟防治還應(yīng)以預(yù)防為主，種群凈化以源頭控制、分類指導(dǎo)、梯度推進(jìn)為原則。同時建立以養(yǎng)殖場為防治主體，以疫病凈化為防治重點(diǎn)，不斷完善的生物安全體系。
《豬繁殖與呼吸綜合征流行動態(tài)與防控策略》
周磊 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)副教授
PRRSV根據(jù)ORF5可以劃分為8個譜系，我國于20世紀(jì)90年代中期發(fā)生和流行該病，2006年爆發(fā)HP-PRRS，2014發(fā)現(xiàn)類NADC30毒株，2017以后，出現(xiàn)類NADC30重組毒、HP-PRRSV MLV返強(qiáng)毒等。目前我國主要有l(wèi)ineage1（NADC-30/NADC-34）、lineage3（QYYZ）、lineage 5（VR-2332）、lineage 8（HP-PRRSV/CH-1R/CH-1a)，其中l(wèi)ineage1為目前主要流行毒株。
PRRSV疫苗毒的演化與野毒株的重組是驅(qū)動毒株多樣性和新毒株產(chǎn)生的重要機(jī)制，類 NADC30與疫苗病毒重組頻繁。2014年從美國傳入的類NADC30和重組毒株比例在增加，且可在豬場長時間持續(xù)存在，增加細(xì)菌性繼發(fā)感染和死淘率，造成種豬群和生長豬群生產(chǎn)成績不穩(wěn)定。
NADC34毒株和NADC30同樣屬于Lineage1，其對仔豬的致病性相對HP-PRRSV不明顯，但重組后的類NADC-34對豬場造成的危害很大，并且與HP-PRRSV /類NADC30抗血清之間無交叉中和作用。
2020年在美國大量爆發(fā)的lineage1c 1-4-4變異株在美國已成為主流毒株，因PRRSV不是豬肉進(jìn)口檢測項目，且美國PRRSV陽性豬允許進(jìn)入屠宰場，因此其通過豬肉進(jìn)口傳入中國的風(fēng)險很大，需予以關(guān)注。
PRRSV的綜合防控主要包括生物安全、科學(xué)免疫和控制繼發(fā)感染三方面。
1）在引種時對后備豬的入群前管理非常重要。
2）PRRS不同類型豬場的疫苗使用原則：一個豬場僅使用一種活疫苗。PRRS陰性豬場（種豬）不用活疫苗；陽性/穩(wěn)定豬場不廣泛使用活疫苗，進(jìn)行后備豬馴化；陽性/不穩(wěn)定、疫情發(fā)生豬場使用活疫苗并制定合理的免疫程序。
3）做好豬場內(nèi)部生物安全措施，加強(qiáng)對豬群繼發(fā)感染的控制。
《新型豬繁殖與呼吸綜合征病毒疫苗組合免疫方案》
宋慶慶 金宇生物技術(shù)股份有限公司研發(fā)總監(jiān)
常規(guī)疫苗沒有非常理想的安全及效力的均衡性，滅活苗對異源毒株的交叉保護(hù)性差，活疫苗存在重組和毒力返強(qiáng)的風(fēng)險。
研發(fā)團(tuán)隊攻克了病毒嵌合技術(shù)、體外重組技術(shù)和轉(zhuǎn)基因安全評估技術(shù)難關(guān)，通過反向遺傳操作技術(shù)研發(fā)基因工程疫苗，該疫苗在經(jīng)典株的骨架上插入HP-PRRSV的結(jié)構(gòu)蛋白，在提供高HP-PRRSV保護(hù)的同時，兼具經(jīng)典藍(lán)耳疫苗的安全性。
滅活疫苗的保護(hù)效果有限，中和抗體的水平比較低，可能出現(xiàn)ADE現(xiàn)象導(dǎo)致發(fā)病更嚴(yán)重。
母豬：對于高流行率的陽性不穩(wěn)定場，豬群嚴(yán)重排毒，可使用活疫苗2次普免，間隔4周。以后每13周進(jìn)行一次普免；對于低流行率的陽性不穩(wěn)定場，豬群存在一定的垂直傳播，可使用活苗+滅活苗；對于陽性穩(wěn)定場，可使用活苗或者滅活苗普免。
仔豬：根據(jù)監(jiān)測結(jié)果選擇不同的免疫方案，主要有活苗免疫、活+死苗免疫。
經(jīng)典株與流行株重組疫苗是防控藍(lán)耳病趨勢，亞單位疫苗對高致病藍(lán)耳具有一定的保護(hù)力。
《標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在豬病診斷檢測中的應(yīng)用》
田克恭 普萊柯、河南農(nóng)業(yè)大學(xué)教授
標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是指具有一個或多個足夠均勻的特性值的物質(zhì)或材料，其具有準(zhǔn)確性、均勻性、穩(wěn)定性的特點(diǎn)。目前體外診斷的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)有：核酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（病原微生物、質(zhì)粒、DNA/RNA、假病毒）、蛋白標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、血清、多糖、激素、免疫因子、小分子化合物等。
標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在獸醫(yī)領(lǐng)域的使用現(xiàn)狀：2018年中國動物疫病防控中心研制的豬繁殖與呼吸綜合征病毒系列標(biāo)準(zhǔn)品成為我國首個獸醫(yī)領(lǐng)域核酸定量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。目前，獸醫(yī)領(lǐng)域標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)僅有21類核酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，暫無蛋白類、血清類標(biāo)準(zhǔn)物，這對于幾百種動物疫病來說是杯水車薪。
標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)主要用于設(shè)備和測量程序的校準(zhǔn)、建立溯源性、方法確認(rèn)、給其他材料賦值和質(zhì)量控制。在獸醫(yī)領(lǐng)域，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的應(yīng)用如下：
1)診斷試劑生產(chǎn)的質(zhì)量控制：生產(chǎn)全過程的質(zhì)量控制都依賴于標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。
2)診斷試劑的性能驗(yàn)證：要用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)對性能（重復(fù)性、分析敏感性、特異性）進(jìn)行驗(yàn)證后，再用臨床樣品進(jìn)行驗(yàn)證。例如對ASFV qPCR試劑盒進(jìn)行性能驗(yàn)證時：使用定量的假病毒標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)評估分析敏感性、重復(fù)性、特異性。
3)檢測儀器性能驗(yàn)證：儀器生化性能驗(yàn)證需要使用標(biāo)準(zhǔn)物品。
4)檢測人員操作評價：利用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)評價人員倍比稀釋操作是否規(guī)范性、重復(fù)性是否良好。
5)檢測實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證：給予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，通過實(shí)驗(yàn)室間比對進(jìn)行能力驗(yàn)證。評價的指標(biāo)有：平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差、變異系數(shù)、最大值、最小值等。針對實(shí)驗(yàn)室的檢測結(jié)果，可以給出相應(yīng)建議，從而提高實(shí)驗(yàn)室的檢測能力。
《E2基因工程亞單位疫苗對豬瘟的深度防控與凈化》
王楊 天康生物制藥有限公司技術(shù)服務(wù)部主任
我國主要流行的是非典型豬瘟，其流行范圍廣、無季節(jié)性，發(fā)病常見于斷奶前后和出生10日齡以內(nèi)的仔豬。與經(jīng)典豬瘟的臨床癥狀不同，非典型豬瘟以頑固性腹瀉、繁殖障礙（母豬流產(chǎn)，仔豬死胎、木乃伊胎等）、呼吸道癥狀、神經(jīng)癥狀為主。
豬瘟病毒感染會引起嚴(yán)重的白細(xì)胞減少，造成免疫抑制，常與豬圓環(huán)病毒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒、豬偽狂犬病毒混合感染。
在我國豬瘟疫苗為1.1亞型，而流行的豬瘟野毒為2.1亞型，那么該疫苗的保護(hù)效果就有待評估。有研究指出，雖然我國的豬瘟疫苗免疫覆蓋率高，但實(shí)際陽性保護(hù)率卻較低。因此，我們要給予豬瘟更多的關(guān)注，要多監(jiān)測豬場的豬瘟抗體、抗原水平。
目前豬瘟疫苗可以分為活疫苗、滅活苗兩大類?；钜呙绨巳橥迷?、脾淋源、牛睪丸原代細(xì)胞源、ST傳代細(xì)胞源、PK細(xì)胞源的疫苗。滅活苗包括了豬瘟結(jié)晶紫疫苗、豬瘟E2亞單位疫苗。1.1亞型的豬瘟乳兔源疫苗是傳統(tǒng)的豬瘟保護(hù)疫苗，而現(xiàn)在豬瘟E2亞單位疫苗對豬瘟E2基因進(jìn)行了修飾，涵蓋了1.1、2.1、2.2、2.3亞型的有效抗原表位，無論在深度防控還是在緊急免疫中表現(xiàn)都更好，是未來豬瘟疫苗的流行趨勢。相對于之前的豬瘟E2疫苗，目前的E2疫苗無論在抗原表位修飾、抗原緩釋、抗原含量等方面都有了更好的提升。
《豬支原體肺炎肺部評分的至簡方案》
申世川 法國詩華獸醫(yī)服務(wù)部經(jīng)理
豬支原體肺炎是由豬肺炎支原體引起的慢性接觸性呼吸道疾病，又稱地方流行肺炎或豬氣喘病，在全球養(yǎng)豬業(yè)流行。豬支原體肺炎主要引起保育豬、種豬、育肥豬干咳，導(dǎo)致日增重和飼料轉(zhuǎn)化率降低，影響?zhàn)B豬效益，也可能為亞臨床感染，不表現(xiàn)臨床癥狀。豬肺炎支原體若與其他條件致病菌或呼吸道病毒混合感染，可能導(dǎo)致死亡率增加。
豬肺炎支原體無細(xì)胞壁、生長速度緩慢、培養(yǎng)困難，不同肺炎支原體菌株毒力不同。其感染的特點(diǎn)為：纖毛破壞、細(xì)胞因子浸潤導(dǎo)致肺炎，抗原逃逸導(dǎo)致持續(xù)性感染，免疫力下降。剖檢病變主要為：肺尖葉、心葉、中間葉等對稱樣肉變，嚴(yán)重時可見于膈葉前部。在慢性感染后，肺部剖檢常呈深紅色肉變，切面潮濕，有少量泡沫的狀態(tài)。病理組織變化為上皮細(xì)胞增生、單核細(xì)胞浸潤、肺泡性氣腫、肺細(xì)胞過度增大等。
常用的診斷方法如聽咳嗽聲音、血清學(xué)抗體檢測、肺炎支原體PCR檢測、病原分離等不太適用于該病的臨床診斷。對于豬支原體肺炎的診斷主要依靠豬支原體肺炎屠宰檢查、肺部評分。
屠宰檢查不違背生物安全原則，可以發(fā)現(xiàn)一些亞臨床疾病，且樣品數(shù)量大，對養(yǎng)豬有一定的指導(dǎo)作用。屠宰檢查、肺部評分對于豬場是非常必要的，因?yàn)樨i的呼吸道疾病主要發(fā)生在育肥期，通過屠宰檢查可以了解呼吸道疾病的流行狀況。另一方面，肺部評分是一種對群體動物健康狀態(tài)的評估，并非僅針對患病或死亡動物。該方法重復(fù)性好，可與其他豬場的情況進(jìn)行比較，還可以用于評估免疫效果。
《豬圓環(huán)高效防控方案-好抽、易打、防僵豬》
曾亮明 兆豐華集團(tuán)豬疫苗產(chǎn)品中心總監(jiān)
豬圓環(huán)病毒（PCV）是迄今發(fā)現(xiàn)的最小的動物病毒之一。PCV1無致病性；PCV2廣泛存在，是引起豬圓環(huán)病毒相關(guān)疾病最主要的致病因素；PCV3主要流行于我國華中、華南地區(qū)；PCV4是近幾年剛發(fā)現(xiàn)的，有待進(jìn)一步研究。圓環(huán)病毒雖然病毒粒子小，但其不同亞型表面蛋白具有差異，這提示我們要選擇交叉保護(hù)效果好的疫苗進(jìn)行免疫。
PCV可以引起多種臨床癥狀：1）斷奶仔豬多系統(tǒng)消耗綜合征（PMWS），其主要表現(xiàn)為仔豬消瘦、呼吸困難、皮膚蒼白、體表淋巴結(jié)腫大、黃疸和腹瀉。2）豬皮炎腎病綜合征（PDNS），主要表現(xiàn)為皮膚出現(xiàn)不規(guī)則疹塊、跛行、發(fā)熱，病理剖檢可見腎臟腫大、蒼白、有出血點(diǎn)。3）豬呼吸道并綜合征（PRDC），主要表現(xiàn)為生長緩慢、咳嗽、呼吸困難等。4）繁殖障礙，造成流產(chǎn)、死胎、木乃伊胎。
目前中國有55個廠家生產(chǎn)了16種PCV疫苗，包括了全病毒滅活疫苗、聯(lián)苗、基因工程疫苗、進(jìn)口疫苗，保護(hù)效果最全面的是全病毒疫苗。
PCV疫苗仍存在一些缺陷：1）PCV組織噬性廣，抗原表位多樣，免疫原性差，使得簡單制備的疫苗不能起到理想的效果。2）疫苗解除免疫抑制的效果差。3）雙向佐劑和油苗的使用體驗(yàn)差，抽取和注射困難，注射后有漏液、豬脖子鼓包等現(xiàn)象。因此，PCV疫苗的研發(fā)需要朝著這三個方向進(jìn)一步努力。
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