各省、自治區(qū)、直轄市動物疫病預防控制機構、新疆生產(chǎn)建設兵團畜牧獸醫(yī)工作總站,各有關單位:
為做好我國豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)精準防控與技術指導,科學研判豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)流行態(tài)勢,推進PRRS凈化,中國動物疫病預防控制中心豬繁殖與呼吸綜合征參考實驗室于2025年10月起,在全國范圍內(nèi)開展2025-2026年冬春季PRRSV全基因組測序行動,面向養(yǎng)殖場戶收集PRRS陽性樣品,參考實驗室根據(jù)病料CT值及病毒分離鑒定情況,開展100份陽性樣品的全基因序列分析,并將檢測結(jié)果反饋相應省份及養(yǎng)殖場戶,用于指導PRRS防控與凈化。現(xiàn)將有關事項通知如下。
一、行動目標
全國范圍收集不少于300份PRRS陽性樣品,完成其中100份樣品全基因組測序,開展PRRSV流行趨勢分析,形成并發(fā)布分析報告,建立并完善國家PRRS參考實驗室PRRSV全基因組序列數(shù)據(jù)庫,指導各地做好PRRS防控工作。
二、采樣要求
PRRS陽性樣品的收集需嚴格遵循無菌操作、適時采集、適量保存的原則,以確保病料中病毒含量充足、避免污染,為后續(xù)實驗室檢測(如測序、病毒分離)提供可靠材料。
(一)采樣前準備
人員防護:采樣人員需穿戴一次性防護服、手套、口罩,避免直接接觸病料。
工具消毒:所有采樣工具(如手術刀、剪子、鑷子、注射器、離心管)需經(jīng)高壓蒸汽滅菌(121℃,20分鐘)或干熱滅菌(160℃,2小時)處理;一次性工具需確保無破損、無污染。
病料容器:使用無菌、密封的容器(如自封袋、離心管、病毒保存液管),標注樣品信息(樣品編號、采樣日期、組織類型、發(fā)病背景)。
(二)采樣時機選擇
PRRSV感染的急性期(發(fā)病初期)是采樣最佳時機,此時病料中病毒含量最高,檢測陽性率最高。
組織樣品:需在豬只死亡后6小時內(nèi)采集,避免組織腐敗導致病毒降解。
血清樣品:采集前用酒精棉擦拭采血部位消毒,采集全血不少于10mL,分離血清量不少于5mL。
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發(fā)現(xiàn)疑似PRRSV感染的病豬(如臨床發(fā)生母豬流產(chǎn)、死胎、呼吸困難等癥狀),采集同一發(fā)病群體3-5份病料(僅限肺臟、扁桃體、淋巴結(jié)、血清),經(jīng)實驗室熒光RT-PCR檢測證實為PRRSV陽性后送樣。為確保后續(xù)病毒分離和測序的成功率,建議送檢CT值不高于25的樣品。同一縣區(qū)的同一養(yǎng)殖場戶送樣不超過5份。
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PRRSV可感染豬的多個組織器官,肺臟、扁桃體、淋巴結(jié)、血清是最常用的樣本類型,具體采集方法如下:
1.組織樣品
肺臟:取病變明顯的肺組織如肺尖、肺門周圍的間質(zhì)性肺炎病灶,用無菌手術刀切取5-10g,放入無菌自封袋或離心管中。
淋巴結(jié):取病變的腸系膜淋巴結(jié)或頸部淋巴結(jié)等,切取3-5g,單獨包裝。
扁桃體:用無菌鑷子取出扁桃體,放入無菌袋中,單獨包裝。
2.血清樣品
用無菌注射器抽取豬只前腔靜脈血(10mL),傾斜放置或離心,待血清析出后裝入血清分離管中。每份組織單獨包裝,避免交叉污染。
?。ㄎ澹悠繁4媾c寄送
短期保存(24小時內(nèi)送檢):組織或血清樣品放入4℃冰箱冷藏保存。
長期保存(超過24小時):組織樣品:放入-20℃冰箱冷凍(可保存1-3個月);血清樣品:放入-20℃冰箱保存(可保存6個月以上);避免反復凍融。
樣品寄送:病料需放入保溫箱(內(nèi)加冰袋或干冰)并填寫樣品寄送單(見附件),確保全程冷鏈運輸。樣品可通過當?shù)匾呖貦C構寄送,或經(jīng)當?shù)匾呖貦C構確認PRRS陽性后直接寄送中國動物疫病預防控制中心PRRS參考實驗室。
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PRRS陽性樣品屬于潛在傳染源,其包裝、運輸及無害化處理均需嚴格遵守《病原微生物實驗室生物安全管理條例》等相關規(guī)定,嚴防泄漏,確保生物安全。
三、條件保障
中國動物疫病預防控制中心PRRS參考實驗室負責全部PRRS陽性樣品全基因組測序與分析、數(shù)據(jù)分析與報告撰寫、結(jié)果反饋與技術支撐,PRRSV全基因組數(shù)據(jù)庫建設與維護。
各地各級疫控機構負責本次行動的組織與宣傳引導,對擬寄送樣品進行初核,確保樣品信息準確、完整,保存運輸條件符合要求。指導送樣單位按要求填寫《PRRS陽性樣品采樣單》,可為轄區(qū)內(nèi)養(yǎng)殖場戶提供樣品集中寄送的便利或指導,確保樣品通過安全、可靠的冷鏈途徑及時送達參考實驗室。
本次行動所需的陽性樣品全基因組測序、數(shù)據(jù)分析及數(shù)據(jù)庫建立等費用由PRRS參考實驗室承擔。各地疫控機構組織開展宣傳動員、樣品初篩及相關協(xié)調(diào)工作的經(jīng)費由各單位自行保障。鼓勵有條件的地方對積極參與行動的養(yǎng)殖場戶給予適當激勵與條件保障。
四、聯(lián)系人及聯(lián)系方式
樣品寄送地址及聯(lián)系人:北京市大興區(qū)天貴大街17號中國動物疫病預防控制中心,李明陽:16692722969
PRRS參考實驗室聯(lián)系人及聯(lián)系方式:
周智:010-59198918 ;王睿男:010-59198934。
中國動物疫病預防控制中心
(農(nóng)業(yè)農(nóng)村部屠宰技術中心)
2025年10月22日
